【耗材】我要去美国，卖采样拭子！

7月7日美国白宫发言人麦克尼尼说道，“他（特朗普）认为，作为联邦政府，我们有能力应对这些疫情。我们有很好的治疗方法...我认为，世界正把我们视为（抗击）新冠肺炎疫情的领导者。”

几个月来，特朗普政府一直声称美国即将摆脱冠状病毒，特朗普此前还说，“我们离摆脱它越来越近了”。

上周，他对福克斯商业频道表示，他认为“在某种程度上”病毒“会消失”。但美国顶级传染病专家福奇警告说，“我们上升了，从来没有降至基线，现在又急剧上升。”

在新冠病毒全球流行几个月后，美国多地却再次陷入新冠检测危机：包括新奥尔良、凤凰城、圣安东尼奥等多个大城市正面临新冠检测材料供应短缺、检测处理实验室积压、确诊病例数攀升等难题。

近日，美国新冠疫情出现反弹，连续几天单日新增确诊患者都达到了约5万人。其中，佛罗里达州新冠确诊病例数高达20万例，20多个州目前已经宣布暂停重启经济计划。

据《纽约时报》、美国全国广播公司等报道，在圣安东尼奥等几个确诊数增长迅速的大城市中，对于新冠检测的限制政策无奈地恢复到了几个月：只有表现出症状的人才能接受检测。

美国《政治报》网站也报道称，在新冠病毒流行6个月后，美国仍无法解决检测难题。虽然相比于大流行初期，美国大幅提高了测试能力，6月进行了将近1500万次测试，约为4月份的三倍，但是近几周由于许多州的确诊患者数量激增，对于检测的需求也猛增，进而引发了新的检测短缺危机。

7月6日，亚利桑那州新冠确诊人数累计超过10万例，在过去的不到20天里，当地确诊病例数翻了一番。

该州官员表示，亚利桑那州曾经有过大量检测物资储备，但是自5月底至今，大量确诊病例的增加使检测物资陷入短缺，甚至包括用于采集拭子的基本材料，例如棉签。

据《政治报》报道，美国全国22%的公共卫生实验室在6月底时表示，它们的试剂和其他重要检测耗材的库存只够支持一周甚至更短的时间。同时，全美各地的商业实验室在获取足够的试剂方面仍有困难，部分仪器和材料也正在陷入短缺中。

采样拭子

采样拭子直接接触采样部位，其采样头的材质与后续的检测关系密切。采样拭子头应该采用Polyester(PE)合成纤维或Rayon(人造纤维)制成，不能使用海藻酸钙海绵或木棒拭子(包括竹签)，拭子头部的材料也不能为棉花制品，因为棉花的纤维对蛋白质的吸附较强，不易洗脱到后续的保存液中。
而含有海藻酸钙和木制成分的木棒或竹签折断后浸泡在保存液中也会吸附蛋白，甚至会对后续的PCR反应有抑制作用。制造拭子头的材料推荐使用PE纤维、聚酯纤维、聚丙烯纤维等合成纤维，不推荐棉花等天然纤维，也不推荐尼龙类的纤维，因为尼龙类纤维(类似于牙刷刷头)吸水性不佳，导致采样量不足，影响检出率。
采样拭子材料禁用海藻酸钙海绵!拭子柄有折断式、内置式两种。折断式拭子在采样后放入保存管内从靠近采样头部位折断后旋紧管盖即可；内置式拭子在采样后直接将采样拭子放入保存管，将保存管管盖内置的小孔对准手柄顶端旋紧管盖即可。
两种方式比较起来，后者相对安全。折断式拭子在配合使用尺寸较小的保存管时，折断时可能会导致管内液体外溅，应充分注意产品使用不当可能造成的污染风险。
制造拭子柄的材料推荐使用空心聚苯乙烯(PS)挤出管或聚丙烯(PP)注塑压痕管，无论使用何种材料都不能添加海藻酸钙类助剂;不推荐使用木棒或竹签。总之，采样拭子应保证采样量和释放量，所选材料不能有影响后续检测的物质。

病毒保存液

市场上广泛使用的病毒保存液主要有两种，一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液，另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐，添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质，这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂，溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。
保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质，蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白，可以稳定病毒的蛋白质外壳。
由于保存液营养成分丰富，有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长，如果保存液中污染了细菌，则会大量繁殖，其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降，从粉红色变为黄色。
因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分，推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等，不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和 5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂，因为这些组分对PCR反应有影响。
由于这种保存液提供的样本基本是活病毒，可以最大程度保持样本的原始性，后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测，还能用于病毒的培养和分离。
但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液，主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分，这种保存液是直接裂解病毒释放核酸，消除核酸分解酶(RNase)，如果仅用于RT-PCR较为合适，但裂解液可以灭活病毒，这种样本不能用于病毒的培养分离。

保存管

制造保存管的材质应注意选择，有资料提示聚丙烯(Polypropylene)与核酸的吸附有关，特别是在高张力离子浓度时，聚乙烯塑料(Polyethylene)比聚丙烯(Polypropylene)更容易抓住DNA/RNA。

聚乙烯-丙烯聚合物(Polyallomer)塑胶与某些特殊处理的聚丙烯(Polypropylene)塑胶容器更适合做DNA/RNA的储存使用。另外，在使用可折断拭子时，保存管应尽量选择高度大于8厘米的容器，以防止在折断拭子时内容物外溅污染。

生产保存液的水

生产保存液使用的超纯水应经过分子量为13,000的超滤膜过滤，以保证去除生物来源的聚合物杂质，例如RNase、DNase和内毒素，不推荐使用普通纯化水或蒸馏水。

文章来源：IVD从业者 

参考资料：澎湃新闻、腾讯企业号内容等

作 者：锁炎

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